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8,角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（標(biāo)準(zhǔn)品）

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-08

簡(jiǎn)要描述：

NIBSC 03/148,角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（標(biāo)準(zhǔn)品）中使用的 KGF 是成熟人型 KGF 分子的截短形式，殘基 24-163，是通過(guò)重組 DNA 技術(shù)在大腸桿菌中合成的。用于全長(zhǎng)角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)的第一個(gè) WHO 參考試劑因子，殘基 1-163，可用，產(chǎn)品代碼 03/150。

世界衛(wèi)生組織參考試劑

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (24-163)

(KGF(24-163)、FGF-7(24-163))

NIBSC 03/148




細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。


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